36. FASTA-формат необходим для проведения выравнивания в спе-циальных программах, таких как MUSCLE, ClustalW, T-coffee, доступных в режиме онлайн на сайте http://www.ebi.ac.uk в разделе Tools, и Seaview


Чтобы посмотреть этот PDF файл с форматированием и разметкой, скачайте файл и откройте на своем компьютере.
ОȻɊАЗОȼАНИЯ НАɍКИ ɊОɋɋИЙɋКОЙ ɎȿȾȿɊАЦИИ НОȼОɋИȻИɊɋКИЙ Ɏɚкɭльɬɟɬ ɟɫɬɟɫɬɜɟнныɯ нɚɭк Ȼоɪɝоякоɜɚ Ильичɟɜ Пɪɚкɬикɭм молɟкɭляɪной ɜиɪɭɫолоɝии ɍчɟɛно мɟɬоɞичɟɫкоɟ поɫоɛиɟ Ноɜоɫиɛиɪɫк 2013 Ȼоɪɝоякоɜɚ ., Пɪɚкɬикɭм ɜиɪɭɫо поɫоɛиɟ / Ноɜоɫиɛ ɝоɫ Ноɜоɫи , 2013. 34 Поɫоɛиɟ чɚɫɬь пɪɚкɬикɭмɚ молɟкɭляɪной ɜиɪɭɫолоɝии ɋоɞɟɪжиɬ ɬɟоɪɟɬичɟɫкɭю чɚɫɬь коɬоɪой иɫпользоɜɚния ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ ɛиолоɝия ноɟ иɫпользоɜɚниɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ иɫпользɭɟмыɯ Лɚɛоɪɚ ɪɚɛоɬы пɪɚкɬикɭмɚ оɫɜоɟниɟм оɫноɜныɯ пɪинципоɜ ɫɬɟɪильныɯ ɛокɫɚɯ ɛɚкɬɟɪиɚльными поɞɝоɬоɜкой ɫɟкɜɟниɪоɜɚнию оɛɪɚɛоɬкой ɫɟкɜɟниɪоɜɚния Пɪɟɞнɚзнɚчɟно 46- кɭɪɫоɜ оɛɭчɟния нɚɭк 4- мɟɞицинɫкоɝо ɮɚкɭльɬɟɬɚ ɯим поɞɝоɬоɜлɟно ɪɚмкɚɯ ɪɟɚлизɚции Пɪоɝɪɚммы ɪɚзɜиɬия ɝоɫɭ ɞɚɪɫɬɜɟнноɝо оɛɪɚзоɜɚɬɟльноɝо ɭчɪɟжɞɟния ɜыɫшɟɝо пɪоɮɟɫɫионɚльноɝо оɛɪɚзоɜɚния Ноɜоɫиɛиɪɫкий ɝоɫɭɞɚɪɫɬɜɟнный ɭниɜɟɪɫиɬɟɬ 2009- 2018 ɝоɞы пɪи поɞɞɟɪжкɟ Миниɫɬɟɪɫɬɜɚ оɛɪɚзоɜɚния Ɏɟɞɟɪɚции ɫоɝлɚшɟниɟ 14. 37.21.1927). Ноɜоɫиɛиɪɫкий ɝоɫɭɞɚɪɫɬɜɟнный , 2013 Ȼоɪɝоякоɜɚ , 2013 Иɫɬоɪия ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ 4 Ɏɚɝоɬɟɪɚпия иɫɬоɪия 5 Ȼиолоɝия ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ 6 Эколоɝия ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ 10 Иɫпользоɜɚниɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ лɚɛоɪɚɬоɪияɯ 11 ЛАȻОɊАɌОɊНЫȿ ɊАȻОɌЫ Лɚɛоɪɚɬоɪнɚя ɪɚɛоɬɚ Опɪɟɞɟлɟниɟ концɟнɬɪɚции 13 ɪɚɫɬɜоɪɟ ɚɝɚɪоɜыɯ ɫлоɟɜ . Опɪɟɞɟлɟниɟ ɚкɬиɜноɫɬи 4 15 Лɚɛоɪɚɬоɪнɚя ɪɚɛоɬɚ 2. Опɪɟɞɟлɟниɟ концɟнɬɪɚции мɟɬоɞом пɪямоɝо мɟɬоɞом 20 Лɚɛоɪɚɬоɪнɚя ɪɚɛоɬɚ 3. ɛɟлкоɜыɯ ɜзɚимоɞɟйɫɬɜий ɫɬɪɟпɬɚɜиɞинɚ ɫɭɛɫɬɪɚɬом помощью ɬɟɯнолоɝии ɮɚɝоɜоɝо ɞиɫплɟя 23 ɋПИɋОК ЛИɌȿɊАɌɍɊЫ Иɫɬоɪия знɚчɟниɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ Оɬкɪыɬиɟ ɜиɪɭɫоɜ пɚɪɚзиɬиɪɭющиɯ ɛɚкɬɟɪияɯ ɞɟляɬ микɪоɛиолоɝ Ɏɪɟɞɟɪик Ɍɭоɪɬ (1915, Twort) Эɪɟлль (1917, dHerrelle) [1, 2]. чɬо Эɪɟлль ɛолɟɟ чɟɬко пɪɟɞɫɬɚɜлял чɟм ɛɚкɬɟɪиɚльной кɭльɬɭɪы коɬоɪой ɪɚɛоɬɚл нɚзɜɚл ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝом пɪо изошɟл ɝɪɟчɟɫкоɝо ). оцɟнил ɬɟнциɚльноɟ ɫɜоɟɝо оɬкɪыɬия клиничɟɫкоɝо иɫпользоɜɚния [3]. ɋɬоиɬ зɚмɟɬиɬь оɞнɚко нɟкоɬоɪоɟ ɜɪɟмя пɪɟкɪɚщɚлиɫь ɫпоɪы пɪиɪоɞɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ они ɮильɬɪɭющимиɫя ɜиɪɭɫными ɮɟɪмɟнɬɚми [4]. Пɟɪɜɚя золоɬɚя эɪɚ иɫɫлɟɞоɜɚния ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ пɪоɞолжɚлɚɫь 30- 50- . XX пɪиɜɟлɚ ɬɚкиɯ ɞокɚзɚɬɟльɫɬɜо ɝɟнɟɬичɟɫкой ɪоли ɪɚɫшиɮɪоɜкɚ оɬкɪыɬиɟ поɫɪɟɞничɟɫкой ɪоли пɪиɜɟли ɪожɞɟнию пɪоɝɪɟɫɫиɜной нɚɭчной молɟ кɭляɪной ɛиолоɝии ȼɬоɪɚя золоɬɚя 8090- пɪошлоɝо полɭчɟнныɟ пɪоɞɭкɬы ɪɚзɜиɬиɟ ɛиоɬɟɯнолоɝий Ɍɟɯнолоɝия ɪɟкомɛинɚнɬной нɚпɪимɟɪ оɫноɜɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ пɟɪɜичныɯ ɜɟкɬоɪоɜ ɜɟкɬоɪоɜ пɪомоɬоɪы экɫпɪɟɫɫионныɯ ɭпɚкоɜочныɟ ɞля ɜɫɬɪойки инɬɟɝɪɚционныɯ ɜɟкɬоɪоɜ ɪɟплико ɮɚɝмиɞ .) [5]. ȼɞоɛɚɜок ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝи ɫɬɚли иɫɬочникɚми полɭчɟния количɟɫɬɜɚ инɬɟɝɪɚзы полимɟɪɚзы полимɟɪɚзы ɪɟкомɛинɚзы ɫɜязыɜɚющиɟ оɞноцɟпочɟчнɭю (SSB), экзонɭклɟɚзы энɞонɭклɟɚзы ɪɟɫɬɪикции коɬоɪыɟ иɫпользɭюɬɫя ɛиолоɝичɟɫкой лɚɛоɪɚɬоɪии [6]. оɛɪɚзом инɬɟɪɟɫ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝɚм поɫɬоянно ɜыɫоким 70- ɛиолоɝичɟ нɟɞоɫɬɚɬкɚ ɮинɚнɫиɪоɜɚния пɟɪɟключɟния пɟɪɫпɟкɬиɜноɟ эɭкɚɪиоɬичɟɫкиɯ ɫиɫɬɟм . ɜɪɟмя иɫɫлɟɞоɜɚний ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ иɫпользо экɫпонɟнциɚльно нɟɫколько пɪичин поɞъɟмɚ пɟɪɜыɯ ɫɟкɜɟниɪоɜɚния ɛɚкɬɟɪиɚльныɯ ɝɟномоɜ чɬо ɛольшинɫɬɜо яɜляюɬɫя лизоɝɟнными оɞномɭ эɜолюции номɚ ɯозяинɚ [79]. эколоɝи оɛнɚɪɭжили чɬо количɟɫɬɜо почɜɟ ɜоɞɟ 10 100 пɪɟɜышɚɟɬ количɟɫɬɜо клɟɬкɚɯ [10]. Ɍɚким оɛɪɚзом пɪизнɚнɚ ɪоль ɜлиянии попɭляционнɭю эɜолюцию ɛɚкɬɟɪий поɞɞɟɪжɚ пɪиɪоɞныɯ ɛиоɝɟоɯимичɟɫкиɯ циклоɜ кɪɭɝоɜоɪоɬ ɭɝлɟɪоɞɚ [11]. Ȼолɟɟ ɬоɝо ɝɟномныɟ ɬɪɚнɫкɪипɬомныɟ иɫɫлɟɞоɜɚния пɪоɞɟмонɫɬɪиɪоɜɚли ɜыɫокɭю мɟɬɚɛоличɟɫкой ɯозяɟɜ Нɚпɪимɟɪ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝи циɚноɛɚкɬɟɪий ɪɭющɭю пɪочɟɝо ɮоɬоɫинɬɟзɚ [12]. яɜляюɬɫя ɞоɫɬойной ɚльɬɟɪнɚɬиɜой ɚнɬиɛиоɬикɚм мноɝим ɛолɟзнɟɬɜоɪныɯ ɛɚкɬɟɪий чɚщɟ ɭɫɬойчиɜоɫɬь ɯимичɟɫкоɟ ɪɚзнооɛɪɚзиɟ ɚнɬиɛиоɬикоɜ иɫчɟɪпɚно [13]. пɟɪɫпɟкɬиɜы ɏоɬя ɟщё ɛольшим пɟɪɫпɟкɬиɜɚɯ ɮɚɝоɬɟɪɚпии пɟɪɜыми ɭɫпɟшноɟ ɛɚкɬɟɪиɚльной ɫɬɚɮилококкоɜыɯ инɮɟкций пɪоɞɟмонɫɬ ɪиɪоɜɚли ɮɪɚнцɭзɫкиɟ Ȼɪюно 1921 30- Ƚɟоɪɝиɟм пɪи поɞɞɟɪжкɟ Ɏɟликɫɚ Эɪɟлля оɪɝɚнизоɜɚн Мɟжɞɭнɚɪоɞный ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ позжɟ оɛъɟɞинɟн Инɫɬиɬɭɬом микɪоɛиолоɝии эпиɞɟмиолоɝии оɬкɪыɬиɟм шиɪоким ɪɚɫпɪоɫɬɪɚнɟниɟм ɮɚɝоɬɟɪɚпия ɪɚзɜиɬия Оɫноɜныɟ ɪɚɛоɬы ɞɚнной оɛлɚɫɬи ȼоɫɬочной ɋоɜɟɬɫком ɋоюзɟ оɛɪɚзом Инɫɬиɬɭɬɟ коɬоɪый имɟл поɞɪɚзɞɟлɟния ɪɚзɪɚɛоɬки пɪоизɜоɞɫɬɜɚ лɟкɚɪɫɬɜɟнныɯ оɫноɜɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ ɬɚɛлɟɬки ɪɚɫɬɜоɪы ɞля полоɫкɚния ɞоɫɬɭпны эɮɮɟкɬиɜноɫɬь ɛɟзɜɪɟɞны Поɫлɟ ɋоɜɟɬɫкоɝо ɋоюзɚ ɪɚзɪɭшɟнɚ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ чɚɫɬично ɭɬɟɪяны элɟкɬɪоэнɟɪɝии чɚɫɬь оɛоɪɭɞоɜɚния момɟнɬ оɛɪɚзоɜɚно НПО Ȼɚкɬɟɪиоɮɚɝ пɪоизɜоɞɫɬɜɟнными площɚɞкɚми ɏɚɛɚɪоɜɫкɟ Ноɜɝоɪоɞɟ Пɟɪми [13]. Пɪɟимɭщɟɫɬɜɚ ɮɚɝоɬɟɪɚпии можно пɪиɜɟɫɬи ɫлɟɞɭющим [13]. Ȼɚкɬɟɪиоɮɚɝи ɫɚмоɫɬояɬɟльно конɬɪолиɪɭюɬ ɜоɫпɪоизɜɟɞɟниɟ ɪɚзмножɚяɫь пɪи Ȼɚкɬɟɪиоɮɚɝи ɝоɪɚзɞо ɛолɟɟ ɫпɟциɮичноɫɬью ɚнɬиɛиоɬики пɪиɜоɞиɬ поɜɪɟжɞɟнию ноɪмɚльной микɪоɮлоɪы оɪɝɚнизмɚ ɫлɟɞоɜɚɬɟльно ɪиɫкɚ ɜɬоɪичными ɫопɪоɜожɞɚющими ɞиɫɛɚкɬɟɪио Ȼɚкɬɟɪиоɮɚɝи моɝɭɬ ɜиɪɭлɟнɬноɫɬь ɪɟзиɫɬɟнɬныɯ шɬɚммоɜ иɫпользоɜɚния мишɟни ɪɟцɟпɬоɪоɜ пɚɬоɝɟнɟзɟ ɛɚкɬɟɪии ɜыɪɚжɟнныɯ поɛочныɯ эɮɮɟкɬоɜ Ɏɚɝоɬɟɪɚпия пɪимɟняɬьɫя инɞиɜиɞɭɭмоɜ ɛɟɪɟмɟнным млɚɞɟнцɚм Ȼɚкɬɟɪиоɮɚɝи можно иɫпользоɜɚɬь пɪоɮилɚкɬичɟɫкиɯ пɪɟ ɞоɬɜɪɚщɟниɟ инɮициɪоɜɚния пɪи конɬɚкɬɟ микɪоɛɚми ɭчɪɟжɞɟний ɛоɪьɛɚ ɜнɭɬɪиɛольничными Пɪɟпɚɪɚɬы оɫноɜɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ пɪоизɜоɞɫɬɜɟ можɟɬ ɛыɬь ɭɞоɜлɟɬɜоɪяɬь поɬɪɟɛноɫɬям кон мɟɫɬноɫɬи пɪɟпɚɪɚɬы можно иɫпользоɜɚɬь чɬо ɭмɟньшɚɟɬ ɜɟɪояɬноɫɬь ɪɚзɜиɬия ɪɟзиɫɬɟнɬноɫɬи ɛɚкɬɟɪий Пɪɟпɚɪɚɬы пɪимɟнɟния оɫноɜɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ оɬличɚ ɚнɬиɛиоɬикоɜ ɫпоɫоɛноɫɬью пɪоникɚɬь ɪɚзмно Нɚиɛольшɟɟ пɪимɟнɟниɟ Sta- phylococci Pseudomonas Escherichia Kleibsiella Salmonella ɞиɫɛɚкɬɟɪиозоɜ кишɟчникɚ оɫɬɪыɯ ɝнойно ɜоɫпɚлиɬɟльныɯ ɝоɪлɚ ноɫɚ ɜɪɟмя клиничɟɫкоɝо пɪимɟнɟния шиɪɟ они моɝɭɬ ɯом иɫпользоɜɚны ɯиɪɭɪɝичɟɫкиɯ ɭɪоɝɟниɬɚльныɯ ɞɪɭɝиɯ Ȼиолоɝия ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ ɜиɪɭɫы ɜнɟклɟɬочной ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝи ɫоɛой мɟɬɚɛоличɟɫки инɟɪɬныɟ Ȼольшинɫɬɜо имɟюɬ ɪошо ɫɮоɪмиɪоɜɚннɭю икоɫɚэɞɪичɟɫкɭю ɝолоɜкɭ ɯɜоɫɬ ɪɚзличной ɪɚжɟнноɫɬи иноɝɞɚ ɞополниɬɟльными ɫɬɪɭкɬɭɪɚми опоɫɪɟɞɭющими ɮɚɝɚ ɛɚкɬɟɪиɚльной ɪиɫ Нɟɫмоɬɪя чɬо ɯɜоɫɬɚɬыɟ ɮɚɝи оɫноɜнɭю ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ (96 %), ɫɭщɟɫɬɜɭɟɬ ɛольшоɟ моɪɮолоɝиɟй оɬличной ɪиɫ . 2, . 1) [ ]. ɋɯɟмɚɬичɟɫкоɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝɚ (www.microrao.com) ɋɯɟмɚɬичɟɫкоɟ изоɛɪɚжɟниɟ оɫноɜныɯ ɝɪɭпп ɮɚɝоɜ [18] Ɋɚзнооɛɪɚзиɟ ɝɟномоɜ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ оɛъɟмы ɝɟномоɜ колɟɛлюɬɫя 20 700 kb, ɯоɬя ɛольшинɫɬɜɚ ɫоɫɬɚɜляɟɬ около 50 kb. кɪɭпный пɪɟɞɫɬɚɜиɬɟль ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝ ɞлиной 670 kb оɞним ɫɪɟɞи ɜɫɟɯ ɪɭɫныɯ ɝɟномоɜ пɪɟɜышɚя 4 ɫɚмый ɛɚкɬɟɪиɚльный ном [15, 16]. Ȼольшинɫɬɜо ɮɚɝоɜ ɞɜɭɯцɟпочɟчнɭю ȾНК 4, Mu, P- ɫɭщɟɫɬɜɭюɬ ɝɪɭппы оɞноцɟпочɟчной X174, ), оɞноцɟпочɟчной ɊНК MS2). ȼɫɬɪɟчɚюɬɫя пɪɟɞɫɬɚɜиɬɟли ɝɟном коɬоɪыɯ ɫɟɝмɟнɬиɪоɜɚн оɫноɜном ɝɟномы пɪɟɞɫɬɚɜлɟны нɭклɟиноɜыɯ ( . 1). Ɍɚɛлицɚ 1 Ɋɚзнооɛɪɚзиɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ [18] Моɪɮолоɝия Нɭклɟиноɜɚя Оɬɪяɞы количɟɫɬɜо Оɫоɛɟнноɫɬи оɛолоч (1243) ɋокɪɚщɚющийɫя ɯɜоɫɬ Siphoviridae (3011) кɪɚщɚющийɫя ɯɜоɫɬ ɏɜоɫɬɚɬыɟ Podoviridae (696) Коɪоɬкий ɯɜоɫɬ Кольцɟɜɚя оцȾНК (40) Кольцɟɜɚя пɟɪɫкɪɭчɟннɚя Corticoviridae (3) ɋложно ɭɫɬɪоɟн липиɞы Tectiviridae (18) ȼнɭɬɪɟнняя пɪоɬɟиноɜɚя оцɊНК (39) мɟнɬиɪоɜɚннɚя Cyctoviridae (1) Оɛолочкɚ ɫоɞɟɪ Кольцɟɜɚя оцȾНК Inoviridae (57) или лочкоɜиɞныɟ Lipothrixviridae (6) Оɛолочкɚ ɫоɞɟɪ ɮɚɝи Rudiviridae (2) ɜиɪɭɫ мозɚики (6) оɛолоч Плɟйомоɪɮныɟ Кольцɟɜɚя пɟɪɫкɪɭчɟннɚя (8) ȼɟɪɟɬɟнооɛɪɚзнɚя ɛɟз кɚпɫиɞɚ ɛɚкɬɟɪии ɯɚɪɚкɬɟɪизɭɟɬɫя молɟкɭл поɜɟɪɯноɫɬи поɬɟнциɚльно ɪɟцɟпɬоɪом Мɟɯɚнизм инɮициɪоɜɚния ɪɚзныɯ ɬипоɜ ɮɚɝоɜ ɞля ɜɫɟɯ оно пɪиɜоɞиɬ ɞоɫɬɚɜкɟ ɮɚɝоɜоɝо ɝɟномɚ ɛɚкɬɟɪиɚльной клɟɬки ɜзɚимоɞɟйɫɬɜɭɟɬ ɫинɬɟзиɪɭющим ɚппɚɪɚɬом ɪиɫ . 3). пɪиɜоɞиɬ ɪɚзличным поɫлɟɞɫɬɜиям E. coli попɚɞɚя клɟɬкɭ пол ноɫɬью пɟɪɟключɚюɬ ɪɟɫɭɪɫы пɪоизɜоɞɫɬɜо ноɜыɯ коɬоɪыɟ поɫлɟ ɫкоɪоɝо ɪɚзɪɭшɟния ɜыɫɜоɛожɞɚюɬɫя окɪɭ ɫɪɟɞɭ коэɜолюция ɛɚкɬɟɪия пɪиɜɟлɚ ɜозникноɜɟнию ɮɚɝоɜ лизиɪɭющиɯ ɯозяйɫкиɟ ɛолɟɟ эɮɮɟкɬиɜноɟ ɪɟɚлизɭɟɬɫя ɪɚзными ɪɚзномɭ Нɟкоɬоɪыɟ нɚпɪимɟɪ пɪи пɟɪɟɯоɞяɬ лизоɝɟннɭю ɜɫɬɪɚиɜɚюɬɫя ɝɟном ɝɟнɟɬичɟɫкой инɮоɪмɚциɟй пɟɪɟɞɚюɬɫя поɫлɟɞɭющим поколɟниям Пɪи попɚɞɚнии ɫоɞɟɪжɚщɟй пɪоɮɚɝ ɛɚкɬɟɪий лизоɝɟнными ), опɪɟɞɟлɟнныɟ ɭɫлоɜия пɪоиɫɯоɞиɬ ɮɚɝоɜой ɯɪомо ɪɟпликɚция поɬомɫɬɜɚ ɪɚзɪɭшɟниɟ ɜыɫɜоɛо ноɜыɯ чɚɫɬиц Оɛщɚя ɫɯɟмɚ жизнɟнноɝо ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝɚ [18] ɮɚɝи инɮициɪɭя пɪиɜоɞяɬ зɚмɟɞлɟнию ɪɚзɜиɬия ɪɚзмножɟния ɛɟлки ɮоɪмиɪɭюɬ клɟɬочной ɛɚкɬɟɪий поɪы чɟɪɟз коɬоɪыɟ окɪɭжɚющɭю ɫɪɟɞɭ ноɜыɟ Ɍɚким оɛɪɚзом люɛом ɜзɚимоɞɟйɫɬɜия ɯозяɟɜ ɮɚɝоɜыɯ чɚɫɬиц Эколоɝия ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ попɭляция оцɟночно ɫоɫɬɚɜляɟɬ чɚɫɬиц пɪɟɜышɚɟɬ ɬыɫячи миɪоɜой попɭляции ɫлоноɜ ɬɟɪиоɮɚɝи ɫɚмыɟ мноɝочиɫлɟнныɟ оɪɝɚнизмы [17], чɬо оɞнɭ ɛɚкɬɟɪию ɚɪɯɟɛɚкɬɟɪию пɪиɯоɞиɬɫя 10 ɮɚɝоɜыɯ Поɫколькɭ ɮɚɝи ɫоɛой ɝоɜоɪя нɚɞмолɟкɭляɪныɟ пɟɪɜый ɭɪоɜɟнь оɪɝɚнизɚции коɬоɪом ɪɚɫɫмɚɬɪиɜɚɟɬ эколоɝия оɪɝɚнизмɟнный ɭɪоɜɟнь ɮɚкɬичɟɫки оɞноɜɪɟмɟнно поняɬно клɟɬочный ɭɪоɜɟнь нɟклɟɬочной ɜиɪɭɫоɜ ). Ⱦɚнный эколоɝии чɚɫɬиц ɜиɪионоɜ оɫо ɛɟнноɫɬи ɚɞɫоɪɛции поɞɪоɛноɫɬи пɟɪиоɞоɜ жизнɟнноɝо ɬойчиɜоɫɬь ɪɟɫɬɪикции пɪɟкɪɚщɟнию ɭмɟɪɟнныɯ чɚɫɬоɬɚ пɟɪɟɯоɞɚ лизоɝɟнии оɛɪɚɬно ), ɚɞɚпɬɚции позɜоляющиɟ ɯозяинɚ ɫлоɜом чɟм оɯɚɪɚкɬɟɪизоɜɚɬь оɬɞɟльнɭю Попɭляционнɚя эколоɝия зɚнимɚɟɬɫя ɪɚɫɫмоɬɪɟниɟм ɝɪɭппы ноɝо ɜиɞɚ ɜзɚимоɞɟйɫɬɜий ɝɪɭппы конкɭɪɟнция ɜозможноɫɬь инɮициɪоɜɚния оɝɪɚничɟнныɟ ɫɜойɫɬɜ ɪоɫɬɚ плоɬноɫɬь ɪɚзницɚ ɪоɫɬɚ жиɞкой ɫɪɟɞɟ поɜɟɞɟния ɜыɛоɪ лизоɝɟнии ɪɟпликɚции низкий ɭɪоɜɟнь ɪɚзмножɟния ɞɚнном яɜляюɬ [18]. зɪɟния ɭɪоɜня оɪɝɚнизɚции ɫиɫɬɟмɚ ɪɚɫɫмɚɬɪиɜɚɟɬɫя ɪɚмкɚɯ моɞɟли ɯозяин пɚɪɚзиɬ ɋооɬ коэɜолюция ɞɜɭɯ пɪиɜоɞиɬ ɜозникноɜɟнию оɬношɟний ɜозɞɟйɫɬɜиɟ плоɬноɫɬь попɭля нɚоɛоɪоɬ ɪɚзɜиɬиɟ ɭɫɬойчиɜоɫɬи ɯозяинɚ ɪɚɫшиɪɟниɟ кɪɭɝɚ ɯозяɟɜ ɭɪоɜня ɫмɚɬɪиɜɚɟɬɫя ɜзɚимоɞɟйɫɬɜиɟ ɪɚзныɯ ɜиɞоɜ мɟжɞɭ ɫоɛой мноɝоклɟɬочныɟ оɪɝɚнизмы Ɍɚк нɟкоɬоɪыɟ ɝɟны экзоɬокɫиноɜ ɪɚзɪɭшɚющиɟ жиɜоɬныɯ ɮɚɝоɬɟɪɚпия пɪɚкɬичɟɫкоɟ пɪимɟнɟниɟ ɛиоцɟноɬичɟɫкой эколоɝии 11 иɝɪɚюɬ ɛольшɭю ɪоль поɞɞɟɪжɚнии ɮɭнкциониɪоɜɚ ɛиоɝɟоцɟнозоɜ ɭɪоɜɟнь опиɫыɜɚющий ɪɚɜноɜɟɫныɟ жиɜой нɟжиɜой пɪиɪоɞой ɛлɚɝоɞɚɪя ɫпоɫоɛноɫɬи ɪɚзɪɭшɚɬь ɛɚкɬɟɪии коɬоɪыɟ кɚк ɞɟɫɬɪɭкɬоɪы нɚɯоɞяɬɫя ɫɚмом ɭɪоɜнɟ Поɞ экзоɬокɫиноɜ пɪоиɫɯоɞиɬ ɪɚзɪɭшɟниɟ жиɜоɬныɯ оɛɪɚзом ɜыɫɜоɛожɞɚюɬɫя пɪоɫɬыɟ ɯимичɟɫкиɟ ɫоɟɞинɟния пɪоцɟɫɫы ɫоɫɬɚɜляюɬ кɪɭɝоɜоɪоɬɚ ɭɝлɟɪоɞɚ оɫоɛɟнно микɪоɛной [19]. Иɫпользоɜɚниɟ нɚɭчныɯ лɚɛоɪɚɬоɪияɯ ɜыɫокой ɫпɟциɮичноɫɬи ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ иɫпользɭюɬ ɬипиɪоɜɚния ɜɪɟмя ɜɫпышɟк эпиɞɟмиолоɝичɟɫкиɯ эпизооɬи нозокомиɚльныɯ эɬоɝо ɫозɞɚны ɫɬɚнɞɚɪɬныɟ коɬоɪым шɬɚммы микɪооɪɝɚ низмоɜ ɪɚзɪɚɛоɬɚны ɫɯɟмы ɬипиɪоɜɚния [20]. ɛольшоɟ ɞɪɭɝиɯ мɟɬоɞоɜ шɬɚммоɜ оɫноɜɚнныɯ моɪɮолоɝии ɛиоɯимичɟɫкиɯ ɜиɪɭлɟнɬноɫɬи ɯɚɪɚкɬɟɪиɫɬик ɝɟномоɜ чɭɜɫɬɜиɬɟльноɫɬи ɯимичɟɫким ɜɟщɟɫɬɜɚм ɜключɚя ɚнɬиɛиоɬики ɮɟɪмɟнɬɚм плɚзмиɞном пɪоɮилɟ Ɏɚɝоɬипиɪо ɛыɫɬɪɚя экономичɟɫки ɜыɝоɞнɚя ɜоɫпɪоизɜоɞимɚя ɬɟɯнолоɝия ɫпɟциɚльноɝо оɛоɪɭɞоɜɚния пɪɚкɬикɟ пользɭюɬɫя ɪɚзличныɯ шɬɚммоɜ Bacillus Burkholderia Clostridium difficile Corynebacterium Enterobacter cherichia Listeria Mycobacterium Pasteurella Proteus Sal- monella Serratia Shigella Staphylococcus Streptococcus Yersinia ɞɪɭɝиɯ [21]. пɪоɞɭциɪɭюɬ пɟпɬиɞоɝликɚноɜыɟ ɝиɞɪолɚзы пɪиɪоɞɟ оɞними ɪиолиɬичɟɫкиɯ ɪɚзличий ɫɬɟнки ɝɪɚ моɬɪицɚɬɟльныɯ ɝɪɚмположиɬɟльныɯ ɛɚкɬɟɪий ɪɚзличɚюɬɫя лизины пɟпɬиɞоɝликɚноɜоɝо пɟɪɜыɯ оɞноɝо ɬоɝɞɚ ɭɫɬɪоɟнной ной нɟоɛɯоɞимы ɬɚкжɟ оɛɪɚзом моɝɭɬ ɬɟɪɚпɟɜɬичɟɫкими ɯɚɪɚкɬɟɪизɭющимиɫя ɫпɟциɮичноɫɬью ɛольшомɭ количɟɫɬɜɭ ɝɪɚмположиɬɟльныɯ коɬоɪым оɬноɫиɬɫя ɛɚкɬɟɪи пɚɬоɝɟноɜ [21]. оɫноɜɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝоɜ ɫозɞɚно ɛольшоɟ позɜоляющиɯ ɜыполняɬь ɪɚзличныɟ ɪɚɛоɬы ɛɟлкоɜыɯ ɜзɚимоɞɟйɫɬɜий ɫпɟциɮичноɫɬи кɚɪɬиɪоɜɚниɟ эпиɬопоɜ имиɬиɪɭющиɯ конɮоɪмɚционныɟ ɫɬɪɭкɬɭɪы ɛɟлкоɜыɟ ɭɝлɟɜоɞныɟ липиɞныɟ ɬɚкжɟ яɜляющиɯɫя ɚнɬɚɝониɫɬɚми лиɝɚнɞоɜ ɪɚзличныɯ ɪɟцɟпɬоɪоɜ [22]. пɪɟɞɫɬɚɜлɟны оɛолочɟчныɯ ɜыɞɚюɬɫя окɪɭжɚющɭю ɫооɬɜɟɬɫɬɜɟнно ɫпоɫоɛны ɜзɚимоɞɟйɫɬ инɬɟɪɟɫɭющим оɛъɟкɬом Поɫколькɭ ɬɪопноɫɬи ɬɚкоɟ ɜзɚимоɞɟйɫɬɜиɟ оɛɟɫпɟчиɜɚɟɬɫя чɭжɟɪоɞными ɮɚɝи оɬоɛɪɚɬь иɞɟнɬиɮициɪоɜɚɬь поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬь ноɫиɬ ɜɫɬɪойки моɝɭɬ пɪɟɞɫɬɚɜляɬь ɚминокиɫлоɬныɟ поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬи опɪɟɞɟлɟнной ɮɪɚɝмɟнɬɚми опɪɟɞɟлɟнноɝо [22]. Кɪомɟ линɟйныɯ полипɟпɬиɞныɟ моɝɭɬ пɪɟɞɫɬɚɜлɟны поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬями циклизоɜɚнными оɛɪɚзоɜɚния ɞиɫɭльɮиɞ ноɝо моɫɬикɚ ɪɚɫположɟнными кɪɚям ɜɫɬɪойки иɫпользɭюɬɫя шиɪоко [23]. ɮɚɝоɜоɝо пɪоɫɬɚ зɚɫлɭжилɚ пɪизнɚниɟ миɪɟ 13 ЛАȻОɊАɌОɊНЫȿ ɊАȻОɌЫ лɚɛоɪɚɬоɪноɝо пɪɚкɬикɭмɚ зɚключɚɟɬɫя ɫɬɭɞɟнɬоɜ мɚɝиɫɬɪɚнɬоɜ оɫноɜɚм ɫɬɟɪильной ɪɚɛоɬы кɭльɬɭ опɪɟɞɟлɟнию ɮɚɝоɜыɯ чɚɫɬиц поɞɝо ȾНК ɫɟкɜɟниɪоɜɚнию ɬɟɯникɟ ɮɚɝоɜоɝо оɛɪɚɛоɬкɟ ɫɟкɜɟниɪоɜɚния Оɛоɪɭɞоɜɚниɟ мɚɬɟɪиɚлы ɬɟɪмоɫɬɚɬ ɬɟɪмошɟйкɟɪ микɪоцɟнɬɪиɮɭɝɚ оɯлɚжɞɟниɟм цɟнɬɪиɮɭɝɚ ɪоɬоɪɚми оɯлɚжɞɟниɟм ɚɜɬомɚɬичɟɫкиɟ оɛъɟмом 10, 40, 100 пɪоɛиɪки 10 чɚшки 90 плɚɫɬикоɜыɟ нɚконɟчники плɚɫɬикоɜыɟ нɚконɟчники ɜозɞɭшным 10, 100 96- колɛы 250 цɟнɬɪиɮɭжныɟ пɪоɛиɪки 40 плɚɫɬикоɜыɟ пɪоɛиɪки 1,5 ɋɪɟɞы ɪɚɫɬɜоɪы LB (1 dH O, 10 ɬɪипɬонɚ , 5 ɞɪожжɟɜоɝо экɫɬɪɚкɬɚ Аɜɬоклɚɜиɪоɜɚɬь пɪи , 1,5 % (1 ɫɪɟɞы LB, 15 Аɜɬоклɚɜиɪоɜɚɬь ɯɪɚниɬь пɪи ɜɟɪɯний , 0,7 % (1 ɫɪɟɞы LB, 7 Аɜɬоклɚɜиɪоɜɚɬь ɯɪɚниɬь пɪи ɫɬокоɜый ɪɚɫɬɜоɪ ɬɟɬɪɚциклинɚ (20 dH 1 : 1); ɪɚзɜɟɞɟния (990 dH2O, 10 -HCl (pH 7,5), 2 MgSO4*7H2O); 0,1 NaHCO (pH 8,6) (100 dH O, 0,84 NaHCO ɫɬɪɟпɬɚɜиɞин , 100 0,1 NaHCO (pH 8,6); IPTG/Xgal (5 , 0,25 IPTG, 0,20 Xgal. ɯɪɚниɬь пɪи 20 (100 0,1 NaHCO3 (pH 8,6), 0,5 Оɬɮильɬɪоɜɚɬь ɯɪɚниɬь пɪи TBS (200 dH2O, 1,211 ɬɪиɫɚ , 1,755 NaCl, pH 7,5. Аɜɬоклɚɜи ɪоɜɚɬь ɯɪɚниɬь пɪи TBST (0,1 % 99,9 TBS + 0,1 Tween-20; 0,5 % 99,5 + 0,5 Tween-20); элюиɪɭющий (50 dH2O, 0,751 , 0,05 2,2); нɟйɬɪɚлизɭющий 1 -HCl (10 dH2O, 1,21 ɬɪиɫɚ pH 9,1); пɪɟципиɬиɪɭющий ɛɭɮɟɪ (50 dH2O, 10 , 7,313 йоɞный (1 NaI. ɏɪɚниɬь ɬɟмноɬɟ пɪи dH2O, 0,121 ɬɪиɫɚ , 0,029 , pH 8,0). Ȼиолоɝичɟɫкиɟ мɚɬɟɪиɚлы ночныɟ кɭльɬɭɪы шɬɚммы ER2738, H, B; 4; 13; комɛинɚɬоɪнɚя оɫноɜɟ ниɬчɚɬоɝо Пɪимɟчɚния ɞоɜоɞиɬь нɭжноɝо иɫпользɭя NaOH поɞлɟжɚщиɟ нɟоɛɯоɞимо ɮильɬɪоɜɚɬь зɚɪɚɫɬɚния пɪиɝоɬоɜлɟниɟ ночной чɚшки Пɟɬɪи коɬоɪой ɯɪɚниɬɫя ɛɚкɬɟɪиɚльнɚя ɫɬɟɪильно пɟɪɟнɟɫɬи ɪиɚлɚ 5 LB c 5 ɬɟɬɪɚциклинɚ Поɫɬɚɜиɬь ночь ɬɟɪмошɟйкɟɪ пɪи 37 ɭɛɪɚɬь ɯолоɞильник 15 ЛАȻОɊАɌОɊНАЯ ɊАȻОɌА концɟнɬɪɚции ɮɚɝоɜ 13 ɪɚɫɬɜоɪɟ мɟɬоɞом ɚɝɚɪоɜыɯ Опɪɟɞɟлɟниɟ лиɬичɟɫкой ɚкɬиɜноɫɬи ɮɚɝɚ Аппɟльмɚнɚ позɜоляɟɬ опɪɟɞɟлиɬь ɮɚɝɚ чɭɜɫɬɜиɬɟльной ɛɚкɬɟɪий ɮɚɝɚ ɪɚзɜɟɞɟния ɮɚɝоɜоɝо жиɞкой нɚиɛольшɟɝо ɪɚзɜɟɞɟ пɪи коɬоɪом ɟщё нɚɛлюɞɚɟɬɫя лизиɫ ɞɚнноɝо яɜляɟɬɫя ɜыɪɚжɟниɟм ɬиɬɪɚ нɚпɪимɟɪ Мɟɬоɞ ɫлоɟɜ мɟɬоɞ Ƚɪɚциɚ позɜоляɟɬ ɬолько ɮɚɝɚ опɪɟɞɟлиɬь концɟнɬɪɚцию опɪɟɞɟлɟния концɟнɬɪɚции ɬиɬɪоɜɚниɟм Опɪɟɞɟлɟниɟ концɟнɬɪɚции инɮɟкционныɯ ɪɭɬинным ɪɚɛоɬы ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝɚми позɜоляющим ɜыяɜиɬь оɛɪɚзоɜɚниɟ пɪозɪɚчныɯ ɛляшɟк оɬɫɭɬɫɬɜиɟ оɪɟолɚ ɜокɪɭɝ Мɟɬоɞ Ƚɪɚциɚ пɪимɟняɟɬɫя ɬɟɯ ɛɚкɬɟɪий коɬоɪыɟ ɫпоɫоɛны оɛɪɚзоɜыɜɚɬь ɝɚзон ɬɜɟɪɞыɯ ɫɪɟɞɚɯ Pseudomonas Escherichia Salmonella Bacillus оɛɪɚзɭющиɯ количɟɫɬɜо инɮɟкционныɯ чɚɫɬиц ɮоɪмиɪоɜɚния нɟɝɚɬиɜной колонии ɜиɞной нɟɜооɪɭжɟнным ɝлɚзом оɛɪɚɬном чɚɫɬиц иɫпользɭюɬɫя элɟкɬɪонной количɟɫɬɜɟннɚя ПЦɊ яɜляɟɬɫя пɪɟɞɫɬɚɜиɬɟлɟм ɯɜоɫɬɚɬыɯ ɫɟмɟйɫɬɜɚ ɯɜоɫɬ коɬоɪыɯ ɫокɪɚɬиɬɟльный икоɫɚэɞɪичɟɫкой ɝолоɜки ɫɜɟɪнɭɬɚ ɞɜɭɯцɟпочɟчнɚя Мɟɯɚ инɮициɪоɜɚния E. coli пɪɟɞɫɬɚɜляɟɬɫя клɚɫɫичɟɫкий поɫлɟ ɚɞɫоɪɛции ɯɜоɫɬоɜыɟ поɞɬяɝиɜɚюɬ ɛɚзɚльнɭю поɜɟɪɯноɫɬи ɛɟлок оɞним коɬоɪоɝо ɜзɚимоɞɟйɫɬɜɭɟɬ клɟɬочной ɪɚɫɬɜоɪяя ɫокɪɚщɚ ȾНК ɜпɪыɫкиɜɚɟɬɫя клɟɬкɭ ɯɚɪɚкɬɟɪизɭɟɬɫя ɜзɪыɜным циклом ɞлящимɫя пɪимɟɪно 30 Поɫлɟ ɮициɪоɜɚния пɪоиɫɯоɞиɬ экɫпɪɟɫɫии ɝɟноɜ ɯозяинɚ ɫинɬɟɬичɟ ɚппɚɪɚɬ пɟɪɟключɚɟɬɫя ɪɟпликɚцию ɮоɪмиɪоɜɚниɟ ɜиɪионоɜ Пɪи нɚкоплɟнии около 300 чɚɫɬиц пɪоиɫɯоɞиɬ ɪɚзɪɭшɟниɟ ɮɚɝи окɪɭжɚющɭю [24]. нɟкоɬоɪыми ɭникɚльными ɫɜойɫɬɜɚми Нɚпɪимɟɪ ɟɝо ɝɟны ɫоɞɟɪжɚɬ ɫɯоɞныɟ эɭкɚɪиоɬичɟɫкими инɬɪоны ɜыɫокой ɫкоɪоɫɬи ɪɟпликɚции ɫоɜɟɪшɚɟɬɫя ɜɫɟɝо 1 ошиɛкɚ 300 копий ɪɚɛоɬы мɟɯɚнизмоɜ ɪɟпɚɪɚции ɫоɞɟɪжиɬ ɬɟɪминɚльныɟ поɜɬоɪы позɜоляющиɟ оɛɪɚзоɜыɜɚɬь конкɚɬɚмɟɪныɟ коɬоɪыɟ нɚɪɟзɚюɬɫя пɪи ɭпɚкоɜкɟ ноɜыɯ ɜиɪионоɜ Поɫколькɭ ȾНК ɛольшɟй ɭпɚкоɜки ɜозникɚɟɬ пɟɪмɭɬɚции цикличɟɫкой пɟɪɟɫɬɚноɜки ɝɟноɜ изɛыɬочныɯ концɟɜыɯ поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬɟй оɛъяɫняɟɬ ɮɚкɬ кольцɟɜɚя ɯоɬя ɝɟном [24]. T4 яɜляɟɬɫя поиɫɬинɟ ɜыɞɚющимɫя оɛъɟкɬом ɫыɝɪɚɜшим оɝɪом ɫɬɚноɜлɟнии ɪɚɛоɬɟ ɮɚɝɚми ɬɪиплɟɬноɫɬь ɜыɪожɞɟнноɫɬь пɪɟпи ɪоль яɜляɟɬɫя ɭмɟɪɟнным ɛɟлкоɜɭю оɛолочкɭ коɬоɪоɝо зɚключɟнɚ кольцɟɜɚя оɞноцɟпочɟчнɚя 13 инɮициɪɭɟɬ F- пɪи ɚɞɫоɪɛции пɪɟпяɬɫɬɜɭɟɬ ɛɚкɬɟɪиями Инɮициɪоɜɚнныɟ ɪɚзɪɭшɚюɬɫя пɪɟкɪɚщɚюɬ ɮɚɝоɜой ȾНК попɚɜшɟй ɛɚкɬɟɪиɚльными ɮɟɪмɟнɬɚми ɞоɫɬɪɚиɜɚɟɬɫя комплɟмɟнɬɚɪнɚя цɟпь оɛɪɚзɭɟɬɫя ɞɜɭɯцɟпочɟчнɚя ɪɟпликɚɬиɜнɚя помощью ɮɚɝоɜыɯ ɮɟɪмɟнɬоɜ pII) кɚɬящɟɝоɫя Полɭчиɜшɚяɫя оɞноцɟпочɟчнɚя ɞоɫɬɪɚиɜɚɟɬɫя ɪɟпликɚɬиɜной ɮоɪмы ɭпɚкоɜыɜɚɟɬɫя ноɜыɯ пɪоиɫɯоɞиɬ чɟɪɟз поɪы клɟɬочной оɛɪɚзоɜɚнныɟ [25]. комɛинɚɬоɪной ɛиолоɝии пɪимɟняɟɬɫя кɚчɟɫɬɜɟ оɫноɜы [22], нɚноɬɟɯнолоɝии оɪɝɚничɟɫкий ɫозɞɚния нɚноɬɪɭɛок окɫиɞɚ ɭɝлɟɪоɞɚ [26]. Цɟлью лɚɛоɪɚɬоɪной ɪɚɛоɬы 1 яɜляɟɬɫя опɪɟɞɟлɟниɟ ɛɚкɬɟɪиоɮɚɝɚ концɟнɬɪɚции опиɫɚниɟ ɪɚкɬɟɪиɫɬик нɟɝɚɬиɜныɯ колоний пɪозɪɚчноɫɬь ɪɚзмɟɪ оɪɟолɚ ). пɪоɜоɞиɬɫя ɫɬɟɪильныɯ ɭɫлоɜияɯ Оɛоɪɭɞоɜɚниɟ мɚɬɟɪиɚлы ɋɬɟɪильныɟ пɪоɛиɪки 10 ɋɬɟɪильныɟ Пɟɬɪи 90 Микɪопипɟɬки ɜɚɪьиɪɭɟмым оɛъɟмом 100 5 Плɚɫɬикоɜыɟ нɚконɟчники Плɚɫɬикоɜыɟ нɚконɟчники ɜозɞɭшным 100 , ȼоɞянɚя Ɍɟɪмоɫɬɚɬ 17 ɋɪɟɞы ɪɚɛочиɟ ɪɚɫɬɜоɪы ɋɪɟɞɚ ȼɟɪɯний Ɍɟɬɪɚциклин Ночнɚя кɭльɬɭɪɚ ɛɚкɬɟɪий E. coli шɬɚммы ER2738 ɪɚɛоɬы ɫɬɟɪильно ɪɚзлиɬь чɚшкɚм Пɟɬɪи (18 оɬкɪыɬыми полноɝо чɚшки ɪɚзɜɟɞɟниɟ оɬɫɬɚɜиɬь ɫɬоɪонɭ иɫпользɭюɬɫя чɚшки ɯолоɞильникɚ нɟоɛɯоɞимо пɟɪɟложиɬь ɬɟɪмоɫɬɚɬ чɬоɛы они нɚɝɪɟ Ɋɚɫɬопиɬь ɜɟɪɯний ɫɬɟɪильно ɪɚзлиɬь 6 пɪо ɛиɪок 34 поɫɬɚɜиɬь нɚɝɪɟɬɭю 48 ɭɞоɛɫɬɜɚ ɪɚɛоɬы можно поɫɬɚɜиɬь пɪоɛиɪки нɚɝɪɟɬой ɜоɞой (24 пɪоɛиɪки ). Ɍиɬɪоɜɚниɟ мɟɬоɞɭ Аппɟльмɚнɚ 9 ɫɬɟɪильныɯ пɪоɛиɪок 10 поɞпиɫɚɬь 10 ɭɫлоɜияɯ ɪɚзлиɬь пɪоɛиɪки 4,5 ɫɪɟɞы пɪоɛиɪкɭ поɞпиɫью 10 500 иɫɫлɟɞɭɟмоɝо пɟɪɟмɟшɚɬь покɚɬɚɜ пɪоɛиɪкɭ лɚɞонɟй Помɟняɜ пɟɪɟнɟɫɬи 500 пɟɪɜоɝо ɪɚзɜɟɞɟния пɪоɛиɪкɭ пɟɪɟмɟшɚɬь Поɜɬоɪиɬь 9 пɪоɛиɪкɟ ɪɚзɜɟɞɟниɟ пɟɪɜонɚчɚльноɝо 10 ɫɬɟɪильныɯ пɪоɛиɪок 10 поɞпиɫɚɬь конɬɪоль ɫɬɟɪильныɯ ɭɫлоɜияɯ пɟɪɟнɟɫɬи пɪоɛиɪки 1 ɫооɬɜɟɬɫɬɜɭющɭю пɪоɛиɪкɭ конɬɪольнɭю пɪоɛиɪкɭ нɚлиɬь ɫɪɟɞы Ⱦоɛɚɜиɬь кɚжɞɭю пɪоɛиɪкɭ 1 ночной кɭльɬɭɪы пɟɪɟ зɚкɪыɬь кɪышкой пɪоɛкой Инкɭɛиɪоɜɚɬь пɪоɛиɪки 37 16 18 чɚɫоɜ ɪɟзɭльɬɚɬоɜ ɞоɫɬɚɬь пɪоɛиɪки Мɚкɫимɚльноɟ ɪɚзɜɟɞɟниɟ пɪи коɬоɪом ɟщё пɪинимɚɟɬɫя Зɚпиɫɚɬь ɪɚɛоɬы ɪɟзɭльɬɚɬ жɭɪнɚл Ɍиɬɪоɜɚниɟ Ƚɪɚциɚ 9 ɫɬɟɪильныɯ пɪоɛиɪок 10 поɞпиɫɚɬь 10 ɭɫлоɜияɯ ɪɚзлиɬь пɪоɛиɪки 4,5 ɫɪɟɞы ɫɟɪийныɟ ɪɚзɜɟɞɟния 13 пɪоɜɟɫɬи оɞноɝо поɜɬоɪиɬь оɬношɟнии ɞɪɭɝоɝо лɚминɚɪɟ шɬɚɬиɜ пɪоɛиɪки ночной кɭльɬɭɪой ȼнимɚниɟ пɟɪɟпɭɬɚɬь ɛɚкɬɟɪиɚльныɟ ɯозяɟɜɚ ɪɚзныɯ нɟоɛɯоɞимо пɪоизɜоɞиɬь ɚккɭɪɚɬно ɜоɞяной пɪоɛиɪкɚми ɜɟɪɯним Иɫпользɭя чиɫɬый ноɫик пɟɪɟнɟɫɬи оɞнɭ пɪоɛиɪок 100 ɛɚкɬɟɪиɚльной зɚɬɟм ноɫикɚ пɪо ɞоɛɚɜиɬь 100 пɟɪɜоɝо ɪɚзɜɟɞɟния Ȼыɫɬɪо пɟɪɟмɟшɚɬь ɫоɞɟɪ жимоɟ пɪоɛиɪки нɟмɟɞлɟнно ɮɚɝоɜоɝо ɪɚзɜɟɞɟния Ȼыɫɬɪо ɪɚɫпɪɟɞɟлиɬь зɚɫɬыɜɚния ноɫик пɪоцɟɞɭɪɭ оɫɬɚльныɯ зɚɬɟм ɪɚзɜɟɞɟний ɞɪɭɝоɝо ɬоɝо кɚк пɟɪɟɜɟɪнɭɬь ɞном ɬɟɪмоɫɬɚɬ 37 ночь ɪɟзɭльɬɚɬоɜ ɫлɟɞɭющий ɞоɫɬɚɬь ɬɟɪмоɫɬɚ Пɪоизɜɟɫɬи поɞɫчɟɬ колоний 50300 ɛляшкɚ Концɟнɬɪɚция чɚɫɬиц иɫɯоɞном ɪɚɫɬɜоɪɟ ɮоɪмɭлɟ ɛляшɟк *10* ɫооɬɜɟɬɫɬɜɭющɟɝо нɚпɪимɟɪ , 190*10*10 = 1,9*10 ). ɍмножɟниɟ 10 пɪоизɜоɞиɬɫя чɬо ɞоɛɚɜлɟно 100 поɫчиɬɚнноɟ концɟнɬɪɚцию 10 1 ɞɚнноɝо ɪɚзɜɟɞɟния Оɯɚɪɚкɬɟɪизоɜɚɬь колонии ɮɚɝоɜ 13. ɋɪɚɜниɬь полɭчɟнныɟ ɪɚзными мɟɬоɞɚми Ɋɟзɭльɬɚɬы лɚɛоɪɚɬоɪный жɭɪнɚл Пɪимɟчɚния Поɫколькɭ концɟнɬɪɚция ɪɚɫɬɜоɪɟ 10 ȻОȿ пɪи ɬиɬɪоɜɚнии ɚɝɚɪоɜыɯ пользоɜɚɬь ɪɚзɜɟɞɟния 49. 19 ɪɟкомɟнɞɭɟɬɫя ɜɫɬɪяɯиɜɚниɟ ɮɚɝоɜыɯ ɪɚɫɬɜоɪоɜ пɟɪɟмɟшиɜɚния ɞоɫɬɚɬочно нɟɫколько покɪɭɬиɬь пɪоɛиɪкɭ мɟж ɪɚзлиɜɚнии чɚшкɚм ɜɟɪɯнɟɝо нижнɟɝо оɛɯоɞимо ɫлɟɞиɬь оɬɫɭɬɫɬɜиɟм поɫколькɭ пɪиɜɟɫɬи ошиɛкɟ ɬиɬɪоɜɚния ночной чɚшки ɯɪɚниɬьɫя ɯолоɞильникɟ поɞɫчɟɬ пɪоизɜоɞиɬɫя поɫлɟ ɪимɟнɬɚ ЛАȻОɊАɌОɊНАЯ ɊАȻОɌА концɟнɬɪɚции ɮɚɝɚ мɟɬоɞом пɪямоɝо поɫɟɜɚ ɞом кɚпли пɪямоɝо пɪоɫɬым ɞополниɬɟльно позɜоляɟɬ оɛɪɚɛоɬɚɬь количɟɫɬɜо оɛɪɚзцоɜ ɫэкономиɬь они мɟɬоɞ ɚɝɚɪоɜыɯ коɬоɪый ɬɚкжɟ оɛɟɫпɟчиɜɚɟɬ ɮоɪмиɪоɜɚниɟ ɪɚзмɟɪɚ опɪɟɞɟлɟния моɪɮолоɝии ɜышɟопиɫɚнныɯ пɪɟ мɟɬоɞ пɪямоɝо поɫɟɜɚ мɟɬоɞ иɫпользɭюɬɫя ɛоɪɚɬоɪияɯ яɜляɟɬɫя пɪɟɞɫɬɚɜиɬɟлɟм ɯɜоɫɬɚɬыɯ ɫɟмɟйɫɬɜɚ Siphoviridae ȼиɪион ɫоɫɬоиɬ ɝолоɜки ɞɜɭɯцɟпочɟчной линɟйной ɯɜоɫɬɚ опоɫɪɟɞɭющими ɚɞɫоɪɛцию поɜɟɪɯно E. coli ɛольшинɫɬɜɟ поɫлɟ попɚɞɚния зɚпɭɫкɚɟɬɫя коɬоɪоɝо пɪоиɫɯоɞиɬ нɚɪɚɛоɬкɚ ɜиɪионоɜ Пɪи нɟкоɬоɪыɯ ɭɫлоɜияɯ ȾНК можɟɬ ɝɟном ɯозяинɚ пɟɪɟɞɚɜɚɬьɫя поɬомɫɬɜɭ ноɜым оɬɜɟчɚюɬ ɮɚɝоɜыɟ ɪɟпɪɟɫɫоɪы коɬоɪыɟ экɫпɪɟɫɫию оɫɬɚльныɯ ɮɚɝоɜыɯ ɝɟноɜ Коɝɞɚ попɚɞɚɟɬ ɫɬɪɟɫɫоɜыɟ ɭɫлоɜия кɚк иɫɬощɟниɟ ɫɪɟɞы оɬɪɚɜлɟниɟ оɛлɭчɟниɟ ɪɟпɪɟɫɫоɪы ɪɚзɪɭшɚюɬɫя пɪоɮɚɝ ɯɪомоɫомы ɯозяйɫкой клɟɬки [27]. оɝɪомноɟ ɜлияниɟ ɪɚзɜиɬиɟ молɟкɭляɪной оɬкɪыɬия 1950 Лɟɞɟɪɛɟɪɝ оɛъɟкɬом очɟнь ɭɞоɛным инɫɬɪɭмɟнɬом ɪɭкɚɯ оɫноɜɟ ɫозɞɚно оɝɪомноɟ количɟɫɬɜо ɜɟкɬоɪоɜ клониɪоɜɚния ɟɝо ɪɟкомɛинɚзɚ Red- опɟɪон иɫпользɭюɬɫя ɝɟнной инжɟнɟ ɪии ɫозɞɚния ɜɟкɬоɪоɜ нɚпɪимɟɪ ɪɚзɜɟɞɟния ɪɟкомɟнɞɭɟɬɫя иɫпользоɜɚɬь ɫɪɟɞɭ ɫоɞɟɪжɚщɭю 110 ɪɚɫɬɜоɪ ɞɜɭɯɜɚлɟнɬныɯ кɚɬионоɜ Mg Ca поɫколькɭ они оɛɟɫпɟчиɜɚюɬ нɚиɛолɟɟ эɮɮɟкɬиɜноɝо пɪикɪɟ нɭклɟиноɜыɟ ɫпоɫоɛɫɬɜɭюɬ ɪɟпликɚции мɚɬɪичноɝо Цɟлью лɚɛоɪɚɬоɪной ɪɚɛоɬы 2 яɜляɟɬɫя опɪɟɞɟлɟниɟ концɟнɬɪɚции мɟɬоɞɚми пɪямоɝо поɫɟɜɚ пɪоɜоɞиɬɫя ɫɬɟɪильныɯ ɭɫлоɜияɯ Оɛоɪɭɞоɜɚниɟ мɚɬɟɪиɚлы ɋɬɟɪильныɟ плɚɫɬикоɜыɟ пɪоɛиɪки 1,5 21 ɋɬɟɪильныɟ чɚшки 90 Микɪопипɟɬки ɜɚɪьиɪɭɟмым оɛъɟмом 20, 200 , 1 нɚконɟчники ɜозɞɭшным 100 , Ɍɟɪмоɫɬɚɬ 37 ɋɪɟɞы ɪɚɛочиɟ ɪɚɫɬɜоɪы ɋɪɟɞɚ ɪɚзɜɟɞɟния Аɝɚɪ 1,5 %. Ночнɚя кɭльɬɭɪɚ ɛɚкɬɟɪий E. coli шɬɚмм ɪɚɛоɬы ɪɚзлиɬь Пɟɬɪи (1820 Оɫɬɚɜиɬь оɬкɪыɬыми полноɝо ɚɝɚɪɚ чɚшки поɞпиɫɚɬь нɚзɜɚния ɮɚмилия ɞɚɬɚ ɫɬоɪонɭ ȿɫли иɫпользɭюɬɫя ɯоло нɟоɛɯоɞимо пɟɪɟложиɬь ɬɟɪмоɫɬɚɬ чɬоɛы они нɚɝɪɟлиɫь 9 пɪоɛиɪок 1,5 поɞпиɫɚɬь 10 10 . ɭɫлоɜияɯ ɪɚзлиɬь пɪоɛиɪки 450 пɪоɛиɪкɭ поɞпиɫью 10 50 иɫɫлɟɞɭɟмоɝо пɪопипɟɬиɪоɜɚɬь ɯоɪошо пɟɪɟмɟшɚɬь Помɟняɜ ноɫик пɟɪɟнɟɫɬи 50 пɟɪɜоɝо ɪɚзɜɟɞɟния пɪоɛиɪкɭ ɫлɟɞɭющɟɝо пɟɪɟмɟшɚɬь Поɜɬоɪиɬь 9 ɪɚз полɭчиɜ поɫлɟɞ пɪоɛиɪкɟ пɟɪɜонɚчɚльноɝо 45 поɫлɟɞниɯ ɪɚзɜɟɞɟний 100 ночной оɫɭщɟɫɬɜляɟɬɫя пипɟɬиɪоɜɚниɟ ноɫики нɟоɛɯоɞимо мɟняɬь ɜɪɟмя ɪɚɛоɬы оɫɭщɟɫɬɜляɬь пɟɪɟноɫ кɭльɬɭ нɚиɛольшɟɝо Инкɭɛиɪоɜɚɬь 1520 пɪи ɬɟмпɟɪɚɬɭɪɟ 37 пɪямоɝо поɫɟɜɚ Оɬоɛɪɚɬь 200 ɪɚзɜɟɞɟния ɛыɫɬɪо ɫооɬɜɟɬɫɬ чɚшкɭ Пɟɬɪи ɪɚɫпɪɟɞɟлиɬь поɜɟɪɯноɫɬи ɚɝɚɪɚ чɚшкɚм лɚминɚɪом 30 пɟɪɟɜɟɪнɭɬь инкɭɛиɪоɜɚɬь ɬɟɪмоɫɬɚɬɟ пɪи 37 2024 чɚɫɚ ɪɟзɭльɬɚɬоɜ ɫлɟɞɭющий ɞоɫɬɚɬь ɬɟɪмоɫɬɚ Пɪоизɜɟɫɬи поɞɫчɟɬ колоний 50300 ɛляшкɚ Концɟнɬɪɚция чɚɫɬиц иɫɯоɞном ɪɚɫɬɜоɪɟ ɮоɪмɭлɟ ɛляшɟк ɫɬɟпɟнь ɫооɬɜɟɬɫɬɜɭющɟɝо нɚпɪимɟɪ , 120*5*10 = 6*10 Ⱦополниɬɟльно кɚчɟɫɬɜɟ иɫпользоɜɚɬь 100 ночной ɪɚзɜɟɞɟнной 500 ɫɪɟɞы 10. 20 ɞɪɭɝой Поɜɬоɪиɬь опɟɪɚцию оɫɬɚльными конɬɪолɟм 11. чɚшкɚм лɚминɚɪом 30 пɟɪɟɜɟɪнɭɬь инкɭɛиɪоɜɚɬь ɬɟɪмоɫɬɚɬɟ пɪи 37 2024 чɚɫɚ 12. ɪɟзɭльɬɚɬоɜ ɫлɟɞɭющий ɞоɫɬɚɬь ɬɟɪмоɫɬɚ Пɪоизɜɟɫɬи поɞɫчɟɬ колоний кɚпляɯ 3 30 ɛляшкɚми ɭɫɪɟɞниɬь ɪɟзɭльɬɚɬ Концɟнɬɪɚция чɚɫɬиц иɫɯоɞном ɪɚɫɬɜоɪɟ ɮоɪмɭлɟ ɫɪɟɞнɟɟ ɛляшɟк *50* нɚпɪимɟɪ , 12*50*10 = 6*10 ȻОȿ 13. ɋɪɚɜниɬь ɪɟзɭльɬɚɬы полɭчɟнныɟ ɪɚзными мɟɬоɞɚми ɏоɞ ɪɚɛоɬы ɪɟзɭльɬɚɬы зɚнɟɫɬи лɚɛоɪɚɬоɪный жɭɪнɚл Пɪимɟчɚния Поɫколькɭ концɟнɬɪɚция ɪɚɫɬɜоɪɟ 10 ȻОȿ пɪи ɬиɬɪоɜɚнии ɚɝɚɪоɜыɯ пользоɜɚɬь ɪɚзɜɟɞɟния 59. ɪɟкомɟнɞɭɟɬɫя ɜɫɬɪяɯиɜɚниɟ ɮɚɝоɜыɯ ɪɚɫɬɜоɪоɜ пɟɪɟмɟшиɜɚния ɞоɫɬɚɬочно ɪɚз пɪоɛиɪки ɪɚзлиɜɚнии нɟоɛɯоɞимо оɬɫɭɬɫɬ пɭзыɪɟй поɫколькɭ пɪиɜɟɫɬи ошиɛкɟ чɬоɛы ɜыɫыɯɚл пɟɪɟɞ ɪɚɛоɬой ɪɚɛоɬɟ кɚпли пɪоизɜоɞиɬь ɪɚзɜɟɞɟний 45 оɞнɭ чɚшкɭ поɞпиɫыɜɚɬь чɚшки Нɟоɛɯоɞимо ɚккɭɪɚɬно нɚноɫиɬь ɫɬɚɪɚяɫь чɬоɛы ɝɪɚницы ɪоɜныɟ ɛɪызɝ пɪоизɜоɞиɬɫя нɚиɛольшɟɝо ɫмɟнɚ ноɫикоɜ ночной чɚшки ɯɪɚниɬьɫя ɯолоɞильникɟ поɞɫчɟɬ пɪоизɜоɞиɬɫя поɫлɟ ɪимɟнɬɚ 23 ЛАȻОɊАɌОɊНАЯ ɊАȻОɌА Изɭчɟниɟ ɛɟлкоɜыɯ ɜзɚимоɞɟйɫɬɜий ɫɭɛɫɬɪɚɬом ɬɟɯнолоɝии ɮɚɝоɜоɝо оɫноɜɟ 13, пɟпɬиɞныɟ ɜɫɬɪойки миноɪныɯ оɛолочɟчныɯ ɛɟлкоɜ pIII, молɟкɭл коɬоɪоɝо нɚɯоɞяɬɫя концɟ чɚɫɬицы оɬɜɟчɚюɬ ɚɞɫоɪɛцию ɮɚɝɚ полоɜыɯ ɜоɪɫинкɚɯ E.coli ɪиɫ . 4). Иɫɬоɪи ɮɚɝоɜый оɫноɜɟ ниɬчɚɬыɯ ɪɚзɪɚɛɚɬыɜɚлɫя pIII, оɫноɜном оɛолочки pVIII. ɜɪɟмя N- концɟɜɭю чɚɫɬь pIII ɜлияɟɬ ноɫɬь инɮɟкционноɫɬь ɮɚɝоɜыɯ ɜɫɬɪойкɚ пɟпɬиɞоɜ ɞлиной ɚминокиɫлоɬныɯ оɫɬɚɬкоɜ N- концɟɜɭю pVIII пɪиɜоɞиɬ нɚɪɭшɟ пɪоцɟɫɫɚ чɚɫɬиц пɪоɛлɟмɚ ɪɟшɚɟɬɫя ɞɟɮɟкɬноɝо ɫиɫɬɟмɟ ɪɟпликɚции ɫпоɫоɛноɝо ɋɯɟмɚɬичɟɫкоɟ ɫɬɪоɟниɟ 13 ɫоɫɬɚɜɟ пɟпɬиɞной (www.sut.ac.th) оɫноɜной оɛолочɟчный ɛɟлок ɞикоɝо ɬипɚ ɪɟзɭльɬɚɬɟ ɬɚкой ɫиɫɬɟмы ɜиɪионы ɛиɛлиоɬɟкɟ оɛлɚɞɚюɬ мозɚицизмом оɛолочкɚ ɫоɫɬоиɬ ноɪмɚльныɯ pVIII. ȼыɛоɪ N- концɚ ɜɫɬɪɚиɜɚния поɫколькɭ ниɪɭɟɬɫя поɜɟɪɯноɫɬи ɮɚɝоɜой чɚɫɬицы яɜляɟɬɫя ɞоɫɬɭпным познɚɜɚния [28]. ɫозɞɚюɬɫя инжɟнɟɪным ɯɚɪɚкɬɟɪизɭюɬɫя пɪямой ɮизичɟɫкой ɜɫɬɪоɟнным пɟпɬиɞом коɞиɪɭющɟй олиɝонɭклɟоɬиɞной ɜɫɬɪойкой ɫооɬɜɟɬɫɬɜɭющий ɝɟн ɪиɫ . 4), чɬо позɜоляɟɬ ɛыɫɬɪо опɪɟɞɟляɬь поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬь поɫɪɟɞ ɫɟкɜɟниɪоɜɚния ɫɟлɟкции ɮɚɝоɬопоɜ экɫпони ɪоɜɚнныɯ чɚɫɬицɚɯ ɛиопɟннинɝом зɚключɚɟɬɫя пɪоɜɟɞɟнии циклоɜ ɛиɛлиоɬɟки иммоɛилизоɜɚн ной оɬмыɜки элюиɪоɜɚнии ɫɜязɚɜшиɯɫя ɝоɜ кɚжɞый ɪɚɭнɞ ɜɜоɞяɬɫя ɫɜязɚɜшиɟɫя пɪɟɞыɞɭ ɬɟм ɫɚмым оɛоɝɚщɚɟɬɫя ɫоɞɟɪжɚщими ɜɫɬɪойки ɜзɚимоɞɟйɫɬɜɭющиɟ мишɟнью ɪиɫ . 5) [29]. Нɟɫмоɬɪя чɬо ɜɫɬɪойкɚ pIII пɪиɜоɞиɬ поɬɟɪɟ инɮɟкционно ɪɚɛоɬɚ нɟоɛɯоɞимɚ пɪɟɞоɬɜɪɚщɟния конɬɚминɚ оɛɪɚзцоɜ коɬоɪый нɟкоɬоɪоɟ пɪɟимɭщɟɫɬɜо пɪи зɚɪɚжɟнии ɬоɝо чɬоɛы можно ɛыло ɪɚзличиɬь ɛляшки оɛɪɚзоɜɚнныɟ ɜɫɬɪойкɚми иɫпользɭɟɬɫя шɬɚмм E. coli lacZ лɚкɬозноɝо опɟɪонɚ ɜɫɟ ɫоɞɟɪжɚɬ чɚɫɬь lacZ, пɟɪɟкɪыɜɚющɭю ɛɚкɬɟɪии Коɝɞɚ инɮициɪɭɟɬ ɝɚлɚкɬозиɞɚзɚ пɪоɞɭкɬ ɝɟнɚ lacZ) ɜоɫɫɬɚнɚɜли комплɟмɟнɬɚции эɬоɝо моɞɟйɫɬɜия ɞоɛɚɜляюɬ ɫɭɛɫɬɪɚɬ X-gal, коɬоɪый пɪи ɪɚɫщɟплɟнии ɝɚлɚкɬозиɞɚзой оɛɪɚзɭɟɬ нɟɪɚɫɬɜоɪимый Пɪи ɮɟɪмɟнɬ ɮɭнкциониɪɭɟɬ окɚзыɜɚюɬɫя окɪɚшɟнными ɋɬɪɟпɬɚɜиɞин эɬо ɛɟлок пɪоɞɭциɪɭɟмый Streptomyces avidinii оɛлɚ ɜыɫокоɚɮɮинным ɛиоɬинɭ Анɚлоɝоɜ нɟкоɜɚлɟнɬноɝо пɪиɪоɞɟ ɜɫɬɪɟчɚɟɬɫя Поэɬомɭ пɚɪɚ ɫɬɪɟпɬɚɜиɞин чɚɫɬо иɫпользɭɟɬɫя ɪɚзличныɯ ɛиомолɟкɭл иммɭноɮɟɪмɟнɬный иммɭноɝиɫɬоɯимичɟɫкий Цɟлью лɚɛоɪɚɬоɪной ɪɚɛоɬы 3 яɜляɟɬɫя ɬɟɯнолоɝии ɮɚɝоɜоɝо полипɟпɬиɞноɝо моɬиɜɚ коɬоɪым ɫɜязыɜɚɟɬɫя ɫɬɪɟпɬɚɜиɞин пɪоɜоɞиɬɫя ɫɬɟɪильныɯ ɭɫлоɜияɯ 25 ɋɯɟмɚ пɪоцɟɞɭɪы ɛиопɟннинɝɚ [29] Оɛоɪɭɞоɜɚниɟ мɚɬɟɪиɚлы ɋɬɟɪильныɟ плɚɫɬикоɜыɟ пɪоɛиɪки 1,5 ɋɬɟɪильныɟ чɚшки 90 Микɪопипɟɬки ɜɚɪьиɪɭɟмым оɛъɟмом 20, 200 , 1 нɚконɟчники ɜозɞɭшным 100 , Ɍɟɪмоɫɬɚɬ 37 96- ɏолоɞильник Колɛɚ 250 10. Цɟнɬɪиɮɭɝɚ ɪоɬоɪɚми оɯлɚжɞɟниɟм 11. пɪоɛиɪки 40 12. Микɪоцɟнɬɪиɮɭɝɚ оɯлɚжɞɟниɟм 13. ȼоɞянɚя ɋɪɟɞы ɪɚɛочиɟ ɪɚɫɬɜоɪы 0,1M NaHCO (pH 8,6). ɋɬɪɟпɬɚɜиɞин , 100 Комɛинɚɬоɪнɚя оɫноɜɟ ниɬчɚɬоɝо Ночнɚя кɭльɬɭɪɚ ɛɚкɬɟɪий E. coli шɬɚммы ER2738. ɋɪɟɞɚ IPTG/Xgal. ȼɟɪɯний Ɍɟɬɪɚциклин 10. Ȼлокиɪɭющий 11. 12. TBST 0,1 %, 0,5 %. 13. 14. Нɟйɬɪɚлизɭющий 15. Пɪɟципиɬиɪɭющий ɛɭɮɟɪ 16. Йоɞный 17. 18. ɏоɞ ɪɚɛоɬы пɟɪɜый Пɪиɝоɬоɜиɬь ɫɬɪɟпɬɚɜиɞинɚ концɟнɬɪɚциɟй 100 0,1 NaHCO 100 оɞноɝо оɞнɭ Зɚкɪыɬь плɟнкой поɫɬɚɜиɬь (4 ɜɬоɪой плɚншɟɬ ɬɪɟмя зɚполнɟнными ɫɬɪɟпɬɚɜиɞинɚ ɜɜɟɪɯ ɮильɬɪоɜɚльнɭю ɪɚɫɬɜоɪɚ 100 ɛлокиɪɭющɟɝо инкɭɛиɪоɜɚɬь кɪɚйнɟй мɟɪɟ ). 27 6- кɪɚɬной TBST (0,1 %), оɫɬɚɬки ɭɞɚɪом Нɟоɛɯоɞимо ɛыɫɬɪо ɜыɫыɯɚния Пɪиɝоɬоɜиɬь 100- кɪɚɬноɟ комɛинɚɬоɪной TBST, ɪɚзлиɬь 100 инкɭɛиɪоɜɚɬь ɬɟмпɟ ɪɚɬɭɪɟ ɬɟчɟниɟ кɪɚɬной ɫмɟной кɚк 4. Нɟоɛɯоɞимо чɬоɛы конɬɚминɚцию элюиɪɭющим 100 10 минɭɬ Оɫɬɚноɜиɬь нɟйɬɪɚли ɪɚɫɬɜоɪом количɟɫɬɜɟ 15 ночнɭю 1 : 100 20 LB 250 ɞоɛɚɜиɬь элюиɪоɜɚнныɟ инкɭɛиɪоɜɚɬь ɬɟɪмошɟйкɟɪɟ 4,55 пɪи 37 ɫоɞɟɪжимоɟ колɛы цɟнɬɪиɮɭжнɭю пɪоɛиɪкɭ ɭɪɚɜно оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь 10 пɪи 10 000 Пɟɪɟнɟ ноɜɭю пɪоɛиɪкɭ ɭɪɚɜноɜɟɫиɬь поɜɬоɪно оɬцɟнɬɪиɮɭ ɝиɪоɜɚɬь 80 % ɫɭпɟɪнɚɬɚнɬɚ пɪоɛиɪкɭ ɞоɛɚɜиɬь 1/6 эɬоɝо оɛъɟмɚ пɪɟципиɬиɪɭющɟɝо ɪɚɫɬɜоɪɚ оɫɬɚɜиɬь ночь ɯолоɞиль (4 ). ɬɪɟɬий 10. ɍɪɚɜноɜɟɫиɬь пɪоɛиɪки оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь 15 пɪи 10 000 мин 11. Аккɭɪɚɬно ɭɞɚлиɬь помощью оɫɚɞок 1 TBS, пɟɪɟнɟɫɬи пɪоɛиɪкɭ оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь минɭɬ пɪи 14 000 12. Пɟɪɟнɟɫɬи ноɜɭю пɪоɛиɪкɭ 1/6 оɛъɟмɚ пɪɟципиɬиɪɭющɟɝо Инкɭɛиɪоɜɚɬь чɚɫɚ 13. Оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь 10 минɭɬ пɪи 14 000 пɪи помощи ɪɟɫɭɫпɟнɞиɪоɜɚɬь 200 Оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь 1 оɫɜоɛожɞɟния нɟɪɚɫɬɜоɪимыɯ компонɟнɬоɜ 14. Пɟɪɟнɟɫɬи ноɜɭю пɪоɛиɪкɭ ɚмплиɮициɪоɜɚн пɟɪɜоɝо ɪɚɭнɞɚ 15. Опɪɟɞɟлиɬь концɟнɬɪɚцию ɪɚɫɬɜоɪɟ мɟɬоɞом ɚɝɚɪоɜыɯ эɬоɝо IPTG/Xgal ɪɚɫчɟɬɟ 1 1 оɫɬɭжɟнноɝо 70 ɬɟмпɟɪɚɬɭɪɚ пɪи коɬоɪой пɪикɚɫɚɬьɫя колɛɟ чɟɬɜɟɪɬый пяɬый 16. зɚполнɟнной ɫɬɪɟпɬɚɜиɞинɚ ɪɚɫɬɜоɪ ɛлокиɪɭющим поɜɬоɪиɬь пɭнкɬы 3. 17. Покɚ инкɭɛиɪɭюɬɫя ɛлокɛɭɮɟɪом пɪоизɜɟɫɬи поɞ колоний ɝолɭɛоɝо концɟнɬɪɚцию Пɪиɝоɬоɜиɬь концɟнɬɪɚциɟй 18. 100 лɭнкɭ инкɭɛиɪоɜɚɬь пɪи комнɚɬной 19. Поɜɬоɪиɬь 515, иɫпользɭя 0,5 % TBST. шɟɫɬой 20. Поɜɬоɪиɬь 1618 56. 21. ɬɪɟɬьɟɝо ɪɚɭнɞɚ оɬɬиɬɪоɜɚɬь мɟɬоɞɭ Ƚɪɚциɚ 22. ночнɭю 1 : 100 LB ɪɚзлиɬь пɪоɛиɪкɚм 1 23. Пɟɬɪи коɬоɪой 100 нɟɝɚɬиɜныɯ колоний ноɫикɚми пɟɪɟнɟɫɬи ɫоɞɟɪжимоɟ ɝолɭɛыɯ ɛляшɟк пɪоɛиɪкɭ ноɫики клоноɜ оɛычно ɯɜɚɬɚɟɬ поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬи оɬɜɟчɚющɟй 24. Инкɭɛиɪоɜɚɬь пɪоɛиɪки ɬɟɪмошɟйкɟɪɟ пɪи 37 4,55 чɚɫоɜ 25. Оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь пɪоɛиɪки 30 ɫɟкɭнɞ пɪи 14 000 ноɜыɟ пɪоɛиɪки мɟняя ноɫики чɬоɛы пɪɟɞоɬɜɪɚɬиɬь конɬɚминɚцию ɋноɜɚ оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь 26. Пɟɪɟнɟɫɬи 80 % пɪоɛиɪки ноɜыɟ ɚмплиɮициɪоɜɚнныɟ клоны нɟоɛɯоɞимо ɫɟкɜɟниɪоɜɚния ɜоɫьмой 27. пɪоɛиɪки пɟɪɟнɟɫɬи 500 пɪоɛиɪки 28. 200 пɪɟципиɬиɪɭющɟɝо ɪɚɫɬɜоɪɚ инкɭɛиɪоɜɚɬь 10 пɪи комнɚɬной ɬɟмпɟɪɚɬɭɪɟ 29. Оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь 10 пɪи 14 000 Оɫɚɞок ɜиɞɟн Ɍщɚɬɟльно пипɟɬкой ɫɭпɟɪнɚ поɫколькɭ ɞɟлɚɟɬ оɛɪɚзцы ȾНК нɟɞоɫɬɭпными ɫɟкɜɟниɪо 30. оɫɚɞок 100 йоɞноɝо ɛɭɮɟɪɚ Ⱦоɛɚɜиɬь 250 инкɭɛиɪоɜɚɬь ɛолɟɟ 10 пɪи комнɚɬной ɬɟмпɟɪɚ ɭɫлоɜияɯ пɪɟимɭщɟɫɬɜɟнно пɪɟципиɬиɪɭɟɬɫя ȾНК оɫɬɚюɬɫя ɪɚɫɬɜоɪɟ 31. Оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪоɜɚɬь 10 минɭɬ пɪи 14 000 пипɟɬкой 29 32. Пɪомыɬь оɫɚɞок 500 70 кɪɚɬко оɬцɟнɬɪиɮɭɝиɪо Пɪомыɬь 500 96 эɬɚнолɚ оɬцɟнɬɪи ɮɭɝиɪоɜɚɬь ɫлиɬь ɜозɞɭɯɟ оɛычно эɬоɝо нɟоɛɯоɞимо около чɚɫɚ 33. оɫɚɞок 30 ɛɭɮɟɪɚ TE. Пɟɪɟɞɚɬь оɛɪɚзцы зɚполниɬь пɪоɛиɪки ɫɟкɜɟниɪɭɟмоɝо ɮɪɚɝмɟнɬɚ 400 пɪɚймɟɪы ɫɟкɜɟниɪоɜɚ gIII 96 позиции ɞɟɜяɬый 34. Оɛɪɚɛоɬкɚ ɫɟкɜɟниɪоɜɚния Поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬи жɞоɝо ɭчɚɫɬкɚ пɪɟɞɫɬɚɜлɟны оɬɞɟльноɝо .ab1. оɬкɪыɜɚɬь пɪоɝɪɚммой FinchTV, ɜоɫпользоɜɚɬьɫя ɞоɫɬɭпной пɪоɝɪɚммой 35. ɪɚɛоɬы нɟоɛɯоɞимо пɟɪɟɜɟɫɬи ɮоɪмɚцию FASTA. эɬоɝо ɫозɞɚɬь .txt, ɮɚɝоɜоɝо клонɚ пɪɟɞшɟɫɬɜɭющим � , ɫлɟɞɭющɭю ɜɫɬɚɜиɬь ɫооɬɜɟɬɫɬɜɭющɭю поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬь ɫкопиɪоɜɚннɭю ɮоɪмɚɬɟ .ab1. 36. ɮоɪмɚɬ нɟоɛɯоɞим пɪоɜɟɞɟния ɜыɪɚɜниɜɚния пɪоɝɪɚммɚɯ ɬɚкиɯ MUSCLE, ClustalW, T-coffee, ɞоɫɬɭпныɯ ɪɟжимɟ онлɚйн ɫɚйɬɟ http://www.ebi.ac.uk ɪɚзɞɟлɟ Tools, Seaview, ɭɫɬɚноɜки пɪимɟɪɟ ɪɚɫɫмоɬɪɟнɚ ɪɚɛоɬɚ пɪоɝɪɚммɟ ClustalW. пɪоɜɟɞɟния ɜыɪɚɜниɜɚния нɟоɛɯоɞимо ɜыɛɪɚɬь ɛиополимɟɪɚ DNA) зɚɝɪɭзиɬь .txt, кнопкɭ Submit. ɋпɭɫɬя нɟкоɬоɪоɟ ɜɪɟмя пɪоɝɪɚммɚ ɜыɪɚɜниɜɚния 37. Оɛɪɚɬиɬь ɜнимɚниɟ поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬи ɪɚзличɚ поɫлɟɞниɯ ɬɪиплɟɬɚ пɟɪɟɞ ɜɫɬɪойкой TCCACC, поɫлɟ ɜɫɬɪойки - AGAGTG. Ɋɟкомɟнɞɭɟɬɫя оɬɞɟльный FASTA поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬями 38. Полɭчɟнный зɚɝɪɭзиɬь пɪоɝɪɚммɭ EMBOSS Transeq, ɞоɫɬɭпнɭю http://www.ebi.ac.uk Tools, пɪɟɞнɚзнɚчɟн ɬɪɚнɫляции полɭчɟнныɯ поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬɟй зɚɝɪɭзки нɟоɛɯоɞимо ɜыɛɪɚɬь ɞополниɬɟльныɟ опции STEP 2 окошкɟ ɜыɛɪɚɬь yes, нɚжɚɬь Submit. Эɬо нɟоɛɯоɞимо поɫколькɭ ɪɟзɭль ɫɟкɜɟниɪоɜɚния оɬɪɚжɚюɬ поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬь нɭклɟоɬиɞоɜ ɪичной коɞиɪɭющɟй Полɭчɟнный ɫпиɫок ɚминокиɫлоɬ поɫлɟɞоɜɚɬɟльноɫɬɟй можно ɜыɪоɜняɬь ClustalW. 31 39. пɟпɬиɞной ɜɫɬɪойки ɜыɛɪɚнной ɪɚɛоɬы ɪиɫɭнкɟ ɜышɟ ɜиɞно чɬо HPQ ( пɪолин пɪиɫɭɬɫɬɜɭɟɬ ɜɫɬɪойкɚɯ яɜляɟɬɫя моɬиɜом ɜɚющимɫя ɫɬɪɟпɬɚɜиɞином Полɭчɟниɟ ɞɚнноɝо лɚɛоɪɚɬоɪной ɪɚɛоɬы 3. пɪомɟжɭɬочныɟ ɪɚɛоɬы ɞолжны оɬɪɚжɟны лɚɛоɪɚɬоɪном жɭɪнɚлɟ Пɪимɟчɚния ɜоɫьмой ɞɟнь очиɫɬкɭ можно пɪоизɜɟɫɬи иɫпользоɜɚниɟм коммɟɪчɟɫкиɯ нɚɛоɪоɜ клɚɫɫичɟɫкими мɟɬоɞɚми пɪɟ ɋПИɋОК ЛИɌȿɊАɌɍɊЫ Twort F. W. An investigation on the nature of the ultramicroscopic viruses 33 18. Calendar R. L., ed . The Bacteriophages. 2 ed. Oxford University Press, 2005. 768 p. 19. Abedon S. T., ed. Bacteriophage ecology. Ca mbridge University Press, 2008. 526 p. 20. Singh A., Arutyunov D., Szymanski C. M., Evoy S. Bacteriophage based ɍчɟɛноɟ изɞɚниɟ Ильичɟɜ Алɟкɫɚнɞɪ Алɟкɫɟɟɜич ȻАКɌȿɊИОɎАȽИ Пɪɚкɬикɭм молɟкɭляɪной ɜиɪɭɫолоɝии мɟɬоɞичɟɫкоɟ поɫоɛиɟ 06.2013 60 84 1/16. Оɮɫɟɬнɚя . 2,12. . 1,97. Ɍиɪɚж 100 Ɋɟɞɚкционно НȽɍ 630090, Ноɜоɫиɛиɪɫк -90, Пиɪоɝоɜɚ

Приложенные файлы

  • pdf 7104090
    Размер файла: 921 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий