Oae.: (495) 777-41-92. Oaen: (495) 741-25-19. www.agat.ru agatagat.ru. АЛК АГАТ. EINO?OEOE? по применению набора реагентов для определения.


Чтобы посмотреть этот PDF файл с форматированием и разметкой, скачайте его и откройте на своем компьютере.
АГАТ
ÈÍÑÒÐÓÊÖÈß
ïî ïðèìåíåíèþ íàáîðà ðåàãåíòîâ äëÿ îïðåäåëåíèÿ
5-аминолевулиновой кислоты в моче

Набор предназначен для качественного и количественного определения
5-аминолевулиновой кислоты (АЛК) в моче в клинико-диагностических и
биохимических лабораториях.
АЛК является важным диагностическим маркером отравления свинцом.
при патологических процессах, связанных с нарушением порфиринового
обмена (порфириях).
Набор рассчитан на проведение 100 качественных или 15 количественных
ПРИНÖИП МÅ
ТО
АЛК реагирует с метилацетоацетатом при нагревании с образованием
пиролла, который селективно экстрагируется этилацетатом. При взаимодействии
пиролла в сильнокислой среде с п-диметиламинобензальдегидом (реактив
Эрлиха) образуется окрашенное в красный цвет соединение, интенсивность
фотометрически при длине волны 553 нм (540–560 нм).
СТАВ НА
РА
иметиламинобензальдегид
(2 г) – 1 флакон;
месь кислот
(уксусная кислота, 14 моль/л, хлорная кислота 0,92
моль/л) – 1 флакон (100 мл);
(ацетат натрия-уксусная кислота 2,0 моль/л, рН 4,6) – 1 флакон
(50 мл);
етилацетоацетат
(этилацетат) – 2 флакона (по 75 мл);
Калибровочный раствор
30 мг/л – 1 флакон (5 мл).
Х
АРА
ТÅРИСТИ
НАБОРА
Чувствительность определения не более 2 мг/л.
МÅРÛ ПРÅ
СТО
РОÆ
При работе с данным набором необходимо соблюдать «Правила устройства,
105173, М
. 1, ООО «А
www.agat.ru [email protected]

Ñ =

6 ,

С –
концентрация АЛК в опытной пробе, мг/л;
6 – концентрация АЛК в калибровочном растворе, с учетом разведения,
Л
РА
НИß И Э
ТА
Набор следует хранить в упаковке предприятия-изготовителя при температуре
+2–25° С в течение всего срока годности.
Срок годности – 2 года.
Для качественного определения АЛК реактив Эрлиха устойчив при хранении
количественного определения использовать свежеприготовленный реактив
Буфер, Метилацетоацетат и Экстрагент после вскрытия флаконов могут
храниться в укупоренном виде при температуре +2–25 °С в течение 1 года,
но не более срока годности набора.
Калибратор после вскрытия флакона может храниться в плотно укупоренном
виде при температуре +2–8° С в течение 1 года, но не более срока годности
об ра
ать с
ад ре су
: 105173,
. М
оск ва
. З
а пад на
. 2,
. 1,
». Т
е ле фо н
спра вок
: (495) 777-41-92.
Затем каждую пробирку центрифугировать 5 минут при 3000 об/мин (1800
g). Отобрать 1,0 мл экстракта (верхнего слоя) и перенести в чистую пробирку.
Прибавить 1,0 мл реактива Эрлиха и тщательно перемешать.
Реакцию на АЛК следует считать положительной, если через 10 минут
после добавления реактива Эрлиха произошло изменение окраски (розовое
или красное окрашивание) по сравнению с холостой (желто-бурая окраска) и
калибровочной пробами. Калибровочная проба, с учетом разведения,
соответствует 6 мг/л АЛК.
В случае положительной реакции рекомендуется провести количественное
определение АЛК.
2. Количественное определение
Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах,
указанных в таблице 2.
Таблица 2.
Содержимое пробирок тщательно перемешать, пробирки закрыть колпачками
из алюминиевой фольги и поместить точно на 10 минут в кипящую водяную
баню. Затем пробирки быстро охладить в потоке холодной воды. В каждую
пробирку прилить по 3,0 мл экстрагента (этилацетата). Пробирки плотно
укупорить и перемешать на шейкере в течение не менее 30 сек. или
встряхнуть вручную 50 раз.
Затем каждую пробирку центрифугировать 5 мин при 3000 об/мин (1800g).
Отобрать 2,0 мл экстракта (верхнего слоя) и перенести в чистую пробирку.
Прибавить 2,0 мл реактива Эрлиха, содержимое пробирок тщательно
перемешать и инкубировать при комнатной температуре (+18-25° С) в течение
10 минут.
Измерить величины оптических плотностей:
– пробы C против пробы A – (
– пробы D против пробы B – (
– пробы E против пробы B – (
при 553 (540–560) нм в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм.
Окраска устойчива в течение 1 часа.
Концентрацию АЛК рассчитать по формуле (1):
режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства
здравоохранения СССР» (М., 1981г.).
Операцию инкубации пробирок с образцами в кипящей водяной бане
следует проводить в вытяжном шкафу.
Реактив Эрлиха содержит уксусную и хлорную кислоты – едкие вещества.
В случае попадания раствора на кожу и слизистые необходимо сразу же
промыть пораженное место большим количеством проточной воды.
Пипетирование per os категорически запрещается. При попадании внутрь
следует немедленно выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
РÓ
ВА
– Спектрофотометр, длина волны 553 нм, или фотоэлектроколориметр,
длина волны 540–560 нм, кювета с толщиной поглощающего свет слоя 10 мм;
– водяная баня, обеспечивающая температуру +100±1° С;
– центрифуга лабораторная на 3000 об/мин;
– секундомер;
– вода дистиллированная;
– пипетки, позволяющие отбирать соответствующие объемы жидкости;
– шейкер;
– пробирки центрифужные вместимостью 5–10 мл.
ПОДÃОТОВ
РÅАÃÅНТОВ Д
Л
ЗА
бриллиантового
крезилового
синего
готов
ИЗА
1. Качественное определение
Компоненты реакционной смеси внести в пробирки в количествах,
указанных в таблице 1.
Таблица 1.
Содержимое пробирок тщательно перемешать, пробирки закрыть колпачками
из алюминиевой фольги и поместить точно на 10 минут в кипящую водяную
баню. Затем пробирки быстро охладить в потоке холодной воды. В каждую
пробирку прилить по 1,5 мл экстрагента (этилацетата). Пробирки плотно
укупорить и перемешать на шейкере в течение не менее 30 сек. или
встряхнуть вручную 50 раз.

Приложенные файлы

  • pdf 7028872
    Размер файла: 113 kB Загрузок: 0

Добавить комментарий